Изучение резистентности клеща варроа к акарицидам

Несмотря на высокую эффективность акарицидных препаратов на основе амитраза, флувалината, флуметрина и кумафоса, применяемых в настоящее время для борьбы с варроатозом пчел, в последнее десятилетие в разных странах мира появляются сообщения о возникновении устойчивости к ним клеща варроа.

Резистентность к акарицидам у клещей варроа может развиваться несколькими путями:

• через изменения в поведении (например, избегание акарицида);
• через понижение проницаемости кутикулы клеща;
• через обезвреживание (нейтрализацию) акарицида ферментами (энзимами), причем уровень противотоксинных ферментов может достичь 3-4% от общей массы белков организма клеща;
• через десенсибилизацию рецепторов, которые являются мишенью ядовитого соединения.

Развитие резистентности ускоряется еще и потому, что у клеща варроа отмечается высокая степень инбридинга.

Механизм возникновения резистентности к флувалинату у популяций клещей варроа, прежде всего, связан с высоким уровнем метаболических эстераз, которые окисляют и нейтрализуют синтетические пиретроиды, значительно снижая их токсический эффект.

В связи с этим перед нами стояла задача провести исследование резистентности популяций клеща варроа к акарицидам, применяемым в настоящее время.

В начале нашего исследования было необходимо определить чувствительность клеща Varroa к акарицидам в тех семьях пчел, где никогда не применяли акарициды, то есть обработка которых против варроатоза проводилась щавелевой и муравьиной кислотами или препаратами растительного происхождения. Такие семьи пчел были найдены нами на частной пасеке Воронежской области. Для получения популяции клеща, достаточной для проведения исследования акарицидной эффективности двух препаратов на основе флувалината и флуметрина, нами были отобраны рамки с трутневым расплодом сразу после запечатывания для исследования. Хранение рамок на время проведения опытов осуществляли в термостате при температуре 32,5-33оС.

Перед проведением испытаний участок сотов 10×15 см вырезали, вскрывали ячейки и препаровальной иглой извлекали куколок трутней и собирали с них самок клеща варроа в чашку Петри.

Для проведения исследований были взяты препараты – Апистан (флувалинат) и Байварол (флуметрин). Полоски разрезали таким образом, чтобы в полученных частях концентрации флувалината составили: 0,01; 0,1; 0,2; 0,5; 1%, а для флуметрина – 0,0002; 0,0005; 0,001; 0,005; 0,05%. Для каждой дозировки использовали не менее 15 живых самок клеща и 3 повторности.

Кусочек полоски с известной концентрацией помещали в чашку Петри с самками клеща V.destructor на 6 часов, после чего переносили их в чистую чашку Петри с двумя живыми личинками рабочей пчелы из запечатанного расплода. Через 48 часов после начала опыта (т.е. через 42 часа после переноса клещей в чистые чашки Петри) проводился подсчет погибших клещей. Определение среднесмертельной концентрации (СК50) проводили методом пробит-анализа по Беленькому М.А. (1959). По оси абсцисс откладывали концентрацию препарата в %, а по оси ординат – процент гибели клещей.

В результате опыта было определено, что СК50 для клещей, никогда ранее не подвергавшихся обработке химическими акарицидами, составляла для флувалината – 0,0148±0,0006 мг/кг, а для флуметрина – 0,00038±0,000015 мг/кг, что является фоновым значением, которое позволит определять степень развития устойчивости популяций клеща V.destructor, ранее имевших контакт с препаратами на основе флувалината и флуметрина.

Для определения резистентности клещей варроа к флувалинату и флуметрину осуществляли отбор рамок с трутневым расплодом сразу после запечатывания с пасек Московской, Воронежской и Минской областей. Нами были обследованы семьи, которые в течение нескольких лет обрабатывались только препаратами на основе флувалината (Воронежская и Московская области) и флуметрина (Минская область).

Таким образом, обследуемые семьи были разделены на 3 группы:

• обрабатываемые только флувалинатом (Воронежская область) – В1;
• обрабатываемые только флувалинатом (Московская область) – М1;
• обрабатываемые только флуметрином (Минская область) – М2.

Исследование акарицидной эффективности и СК50 проводили по той же схеме, что и в первом случае.

На основании полученных результатов определяли показатель резистентности (ПР) по следующей формуле:

         СК50 исследуемой группы клещей

ПР =-------------------------------------------------;

         СК50 чистой группы клещей

Результаты приведены в таблицах 1, 2.

Таблица 1 Чувствительность клещей V.destructor к флувалинату

Из данных, представленных в таблице 1, можно сделать вывод, что длительное применение одного и того же акарицида химической природы привело к возникновению резистентности у популяций клещей, контактировавших с этим веществом. Величина СК50 флувалината для клеща Varroa на этих пасеках увеличилось по сравнению с фоновым показателем в 3,8 раза в Воронежской области и составила 0,0563±0,0013%, в 6,5 в Московской области и составила 0,0954±0,0016%. Следует отметить, что группа М2, которая обрабатывалась флуметрином, также показала достоверное снижение чувствительности к флувалинату, что позволяет говорить о наличии перекрестной резистентости между флувалинатом и флуметрином.

Таблица 2. Чувствительность клещей V.destructor к флуметрину.

• Из результатов, представленных в таблице 2 видно, что к флуметрину у клеща варроа также развивается резистентность, хотя выражена она в меньшей степени.
• На степень выраженности резистентности клещей варроа к акарицидам влияют длительность использования препарата, способ его применения, изменения условий окружающей среды (перемены в погоде, кочевки и т.д.) и др.
• Перекрестная резистентность между флувалинатом и флуметрином связана с тем, что препараты относятся к одной химической группе – синтетическим пиретроидам, следовательно, основной этап их метаболизации в организме клещей происходит по единой схеме.

Котова А.А., научный сотрудник, ГНУ ВНИИ ветеринарной санитарии, гигиены и экологии РАСХН, г. Москва