12.07.2013
Исследование причин гибели пчелиных семей в Восточно-Казахстанской области
М.У. Оспанова, Д.А. Тургалиев, А.А. Кустабаева, Н.И. Жижин, М.Р. Жумабаев, А.З.Мауланов Ш.Н. КасымбековаКазахстанско-Японский инновационный центр Казахский Национальный аграрный университет
Аннотация.
В результате проведенных работ с помощью сканирующей электронной и световой микроскопии у исследуемых пчел были обнаружены овальные, хорошо просвечиваемые микроспоридии внутриклеточного паразита рода Nosema, которая является возбудителем болезни – нозематоз. Нозематоз - инвазионная болезнь, сопровождающаяся расстройством кишечника и изменением средней кишки взрослых пчел и маток. С экономической точки зрения этонаносит большой вред, вызывая массовую гибель пчелиных семей.
Ключевые слова:
Пчелы, воск, мед, инвазия микроспоридии, Nosema.
Введение.
Пчеловодство – одна из важнейших отраслей сельского хозяйства, так как продукция пчеловодства издревле пользуется большим спросом у населения. Однако качество и количество продукции во многом зависят от неотъемлемых объектов пчеловодства - медоносных пчел, жизнеспособность и продуктивность которых во многом определяется экологическим состоянием среды обитания.
Одним из продуктов богатых углеводами (глюкоза, фруктоза, сахароза), витаминами В1, В2, В6, Е, К, С, провитамином А-каротин, фолиевой кислотой природного происхождения является мед, производимый пчелами в результате переработки нектара растений. Качество меда напрямую зависит, как от экологического состояния растений, так и от состояния пчел [1].
Основные причины сокращения пчелиной популяции могут быть абиотические (электромагнитное излучение), биотические (клещи и др.) и антропогенные (нарушение условий содержания и кормления, применение пестицидов) факторы. На фоне отрицательного влияние этих комбинированных факторов у популяции медоносных пчел развиваются вторичные иммунодефициты, что создают благоприятные условия для развития неспецифических инфекционно-клинических заболеваний (к примеру, нозематоз) в различных сочетаниях и ассоциациях. В качестве этиологического фактора могут выступать представители условно - патогенной микрофлоры, отдельные вирусы, являющиеся естественной микрофлорой организма насекомых [2,3].
На сегодняшний день наиболее опасным заболеванием у медоносных пчел является - нозематоз, который широко распространен во всем мире и периодически вызывает массовую гибель пчел на пасеках. Болезнь может возникать во всех зонах разведения медоносных и среднеиндийских пчел при их совместном содержании на пасеках. Заболевание отмечают весной, реже — осенью. Источник заражения — больные пчелы или матка. Возбудитель болезни внутриклеточный спорообразующий паразит рода Nosema. В данный момент известны два вида этого рода Nosemaapis и Nosemaceranae. Однако патогенное воздействие на пчел у N. ceranae выражено значительно сильнее по сравнению с Nosemaapis [4].
В последние годы, во многих странах мира, наблюдается уменьшение популяций пчел связанное с экологическими, абиотическими, биотическими и антропогенными условиями их содержания [5,6]. В 2012 году в Восточно-Казахстанской области (ВКО) Уланского района (с. Саратовка) произошла массовая гибель пчелиных семей.
В связи с этим целью данных исследований является выявление причин гибели пчел вышеуказанного региона Казахстана.
Материалы и методы исследования
Объект исследования: живые пчелы, погибшие пчелы (подмор), сотовый мед вырезанный над расплодной частью гнезда пчел и сотовый мед от погибшей пчелосемьи.
Таблица 1 - Схема отбора проб
Лаб.
номер | № пробы | Название
пробы | Дата отбора
пробы | Дата начала
анализа | Место взятия пробы |
---|---|---|---|---|---|
6 | №2 | Пчелиный
подмор | 18.04.12 | 11.06.12 | ВКО Уланский р-н, с. Саратовка, пчеловод Рузанов В.А В.А. |
7 | №3 | Сотовый мед
вырезанный над расплодной частью гнезда пчел | 18.04.12 | 11.06.12 | ВКО Уланский р-н, с. Саратовка, пчеловод Рузанов В.А. |
8 | №4 | Сотовый мед от
погибшей пчелосемьи | 18.04.12 | 11.06.12 | ВКО Уланский р-н, с. Саратовка, пчеловод Рузанов В.А. |
9 | №5 | Живые пчелы | 18.04.12 | 11.06.12 | ВКО Таврический р-н, с. Саратовка, пчеловод Дорохов М. |
Микробиологические исследования проводили с помощью общепринятых методик. Методические указания по диагностике нозематоза медоносных пчел (1985г.) [7].
Использовались также сканирующий электронный микроскоп «JEOL JSM 6510LA» SERIAL NO 13400019 и сканирующий электронный микроскоп Jeol JSM 6510 LA c ЭДС приставкой, которая позволяет определить микроэлементный состав исследуемого объекта. Максимальное увеличение микроскопа х300000. Успешно применялись оптический микроскоп Leica DM 4000 B SERIAL NO 11888197BZ:012009 и LEICA DM4000B, автоматизированный микроскоп с цифровым управлением для проходящего света, увеличение – х5, х10, х20, х40 и х100+oil.
Казахстанско-Японским инновационным цетром проведена работа по исследованию проб (Таб. - 1), которые были взяты от пчелосемей по 30 пчел с летка и 30 погибших пчел со дна улья.
Микробиологические исследования проводили c помощью выделения культуры на питательных средах (МПА, МПБ). При посеве на питательные среды МПА, МПБ через 24 часа роста культуры не наблюдали. Микроскопическое исследование мазков-отпечатков из брюшка пчел показало ориентировочное значение, в результате этого далее исследования проводили с помощью Методических указаний по диагностике нозематоза медоносных пчел (1985г.).
Различают две формы течения нозематоза – острую (явную) и скрытую (латентную). В данном случае ученые наблюдали острую форму: зараженные пчелы погибали за короткий промежуток времени, опоношенность внутренних стенок улья, гибель маток, большое количество подмора.
Больные пчелы ведут себя беспокойно, издают непривычный шум, вылетают из улья, потребляют много корма. Из улья исходит неприятный запах, стенки и соты покрыты фекалиями. Около летков, на дне улья наблюдается большое количество погибших пчел. Весенний облет недружный, пчелы ползают около улья. Брюшко их мягкое, растянутое, при вскрытии средняя кишка увеличена, белого цвета, поперечная исчерченность исчезает; задняя кишка увеличена или нормальная. Пчелы вялые, мало реагируют на внешние раздражения.
Исследование живых пчел
Для обездвиживания живых пчел помещали в морозильную камеру на 15-20 мин. Затем из каждой пчелы извлекали среднюю кишку. В результате визуального осмотра средней кишки было установлено изменение цвета серовато-белого цвета (у здоровых она розоватая), увеличение длины и диаметра кишки, ткань дряблая, легко рвется.
Далее извлеченную среднюю кишку из каждой пчелы помещали в фарфоровую ступку, заливали равным по объему количеством воды и готовили гомогенную взвесь для дальнейшего исследования при помощи сканирующего электронного (JEOL JSM 6510LA) и оптического микроскопа (Leica DM 4000 B).
Каплю взвеси просматривали под сканирующим электронным (х250) и оптическим микроскопом (при увеличении х100). В поле зрения микроскопа были хорошо видны споры ноземы - овальные, широкие просвечивающиеся тельца, похожие на рисовые зерна.
Исследование погибших пчел (подмора)
У погибших пчел, которые были отобраны со дна улья, отделяли брюшки и тщательно растирали с равным по объему количеством воды до гомогенной взвеси. Каплю взвеси, просматривали под оптическим микроскопом при увеличении х100 , а также на СЭМ при х250. Микроскопические исследования водной суспензии, полученной из брюшек пчел, показали наличие спор ноземы.
Рисунок (а и б выполнен с помощью сканирующего электронного микроскопа JEOL JSM 6510LA, в и г выполнен с помощью оптического микроскопа Leica DM 4000 B).
а) |
б) |
в) |
г) |